【mrs培养基如何配制】MRS培养基是一种常用于乳酸菌(如乳杆菌、双歧杆菌等)分离和培养的合成培养基。其配方科学,能够有效促进乳酸菌的生长,并抑制其他杂菌的繁殖。正确配制MRS培养基对于实验的成功至关重要。
一、MRS培养基简介
MRS培养基全称为“MRS Medium”,由M. R. Rogosa 和 S. A. Sheppard 在1932年提出,主要用于选择性培养乳酸菌。该培养基含有丰富的碳源、氮源、维生素和矿物质,适合乳酸菌的生长与繁殖。
二、MRS培养基配制步骤总结
步骤 | 内容说明 |
1 | 准备所需试剂:胰蛋白胨、酵母提取物、葡萄糖、乙酸钠、柠檬酸氢二铵、硫酸镁、氯化钙、琼脂、蒸馏水等。 |
2 | 按照标准配方称量各组分,通常每升培养基的成分如下: - 胰蛋白胨:10g - 酵母提取物:5g - 葡萄糖:5g - 乙酸钠:5g - 柠檬酸氢二铵:2g - 硫酸镁:0.58g - 氯化钙:0.22g - 琼脂:15g(若需制备固体培养基) |
3 | 将所有成分加入蒸馏水中,充分搅拌至完全溶解。 |
4 | 使用pH计调整培养基pH值至6.2~6.4之间。 |
5 | 分装至三角瓶或试管中,封口后进行高压灭菌(121℃,15分钟)。 |
6 | 灭菌后冷却至适宜温度(约50℃),倒入无菌培养皿中,待其凝固后即可使用。 |
三、注意事项
- 配制过程中应严格遵循无菌操作,防止杂菌污染。
- 不同种类的乳酸菌对培养基的营养需求略有差异,可根据实验目的适当调整配方。
- 若不使用琼脂,则为液体培养基,适用于菌种扩增。
- 培养基应保存在阴凉干燥处,避免阳光直射,开封后尽快使用。
通过以上步骤,可以成功配制出适合乳酸菌生长的MRS培养基。合理的配方和规范的操作是保证实验结果准确性的关键。